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核酸电泳简史

核酸电泳简史

核酸凝胶电泳分离核酸技术，始于20世纪60年代初。 那时，核酸主要基于沉积速度通过密度梯度离心法进行分离，分离情况由核酸的大小和构象决定。 密度梯度离心法不仅过程耗时，且需重型设备和大量的样品投入。1937年瑞典Uppsala大学的Tiselius对电泳仪器作了改进，创造了Tiselius电泳仪，建立了研究蛋白质的移动界面电泳方法。 为寻求突破，研究人员开始探索电场作用下离子或电解液中DNA移动的特征—即 电泳的过程。

通过借鉴已经在蛋白质电泳中使用的技术，核酸电泳进一步发展，开始使用凝胶基质作为分离介质。 早期凝胶电泳实验的分离结果表明了，密度梯度离心分离法(早期确定的核酸分离方法)中沉积系数或 S 值的相关性。3，所用电泳条件不合适电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃。 随着20世纪60年代后期对琼脂糖生产的进一步了解和发展，琼脂糖逐渐取代琼脂成为首要选择凝胶电泳介质。

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电泳技术发展简史

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1809年俄国物理学家Рейсе首先发现电泳现象。他在湿粘土中插上带玻璃管的正负两个电极，加电压后发现正极玻璃管中原有的水层变混浊，即带负电荷的粘土颗粒向正极移动，这就是电泳现象。

1909年Michaelis首先将胶体离子在电场中的移动称为电泳。

1937年瑞典Uppsala大学的Tiselius对电泳仪器作了改进，创造了Tiselius电泳仪，建立了研究蛋白质的移动界面电泳方法。

1948年Wieland和Fischer重新发展了以滤纸作为支持介质的电泳方法，对氨基酸的分离进行过研究。

从本世纪50年代起，特别是1950年Durrum用纸电泳进行了各种蛋白质的分离以后，***了利用各种固体物质（如各种滤纸、醋酸纤维素薄膜、琼脂凝胶、淀粉凝胶等）作为支持介质的区带电泳方法。

1959年Raymond和Weintraub利用人工合成的凝胶作为支持介质，创建了聚丙烯酰胺凝胶电泳，极大地提高了电泳技术的分辨率，***了近代电泳的新时代。电泳槽主体是电泳槽的***部分，用来承载电泳凝胶，形成含有正负极的直流电场，从而能让样品在凝胶内分成电泳条带，终实现样品的电泳分离。30多年来，聚丙烯酰胺凝胶电泳仍是生物化学和分子生物学中对蛋白质、多肽、核酸等生物大分子使用较普遍，分辨率较高的分析鉴定技术，是检验生化物质的较高纯度：即'电泳纯'（一维电泳一条带或二维电泳一个点）的标准分析鉴定方法，至今仍被人们称为是对生物大分子进行分析鉴定的之后、较准确的手段，即'Last Check'.

由80年代发展起来的新的毛细管电泳技术，是化学和生化分析鉴定技术的重要新发展，己受到人们的充分重视。

核酸电泳制胶

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制胶：可以根据具体需要制作小胶、宽胶、长胶或方胶。

现分别介绍四种不同规格凝胶的制作方法。

1、小胶（6cm×6cm）：每个制胶器可以灌制两块小胶，将选好的两个小凝胶托盘平行放入制胶器内，然后把您已经选好齿数（中间带缺口）的加样梳插入到制胶器的定位槽中，倒入加热过的琼脂糖胶液（注意：凝胶液体温度控制在60℃左右，加样孔靠近负极一端）。影响电泳实验泳动速度的重要因素——支持物电泳实验多在固体支持物上进行，使样品中的不同组分形成不同的区带，称区带电泳。

2、宽胶（12cm×6cm）：每个制胶器可以灌制一块宽胶，将选好的凝胶托盘平行放入制胶器内，然后将您选好齿数的加样梳插入到制胶器的定位槽中，倒入加热过的琼脂糖胶液（注意：凝胶液体温度控制在60℃左右，加样孔靠近负极一端）。

3、长胶（6cm×12cm）：每个制胶器可以灌制一块长胶，将选好的凝胶托盘平行放入制胶器内，然后将您选好齿数的加样梳插入到制胶器的定位槽中，倒入加热过的琼脂糖胶液（注意：凝胶液体温度控制在60℃左右，加样孔靠近负极一端）。

3、方胶（12cm×12cm）：每个制胶架可以灌制一块方胶，将选好的凝胶托盘平行放入制胶器内，然后将您选好齿数的加样梳插入到制胶器的定位槽中，倒入加热过的琼脂糖胶液（注意：凝胶液体温度控制在60℃左右，加样孔靠近负极一端）。